一、新城疫实验室诊断技术研究进展（论文文献综述）
张芬芳[1]（2021）在《2017-2020年眉县5种动物疫病免疫抗体检测与分析》文中研究指明口蹄疫（Foot and Mouth Disease,FMD）是由口蹄疫病毒引起的以偶蹄动物为主的急性、热性、高度传染性疫病。世界大部分地区口蹄疫都时有发生,是全球最重要的动物健康问题之一。新城疫（Newcastle Disease,ND）,是由副粘病毒科副粘病毒亚科腮腺炎病毒属的禽副粘病毒I型引起的高度接触性禽类烈性传染病。在我国北方冬春季节交替时易爆发疫情,对蛋鸡会影响产蛋量。高致病性禽流感（Highly Pathogenic Avian Influenza,HPAI）在禽类中传播快、危害大、病死率高。近年来,随着眉县畜牧业蓬勃发展,全县畜禽存栏量逐年增加,畜禽跨区域引种运输日益频繁,由此所引起的猪、牛、羊、鸡等动物疫病传播风险日益加剧,使得眉县各养殖场（户）面临动物疫病的威胁日益严重。因此,通过对相关畜禽疫病抗体进行检测,可以及时掌握该地畜禽主要疫病的抗体水平,科学评估免疫效果,以便查补缺漏,指导抗体水平低下的畜禽或地区及时补免,对有效防范该地区发生重大动物疫病以及推动该县畜牧业高质量发展具有重大指导意义。本研究根据宝鸡市动物疫病监测部署和要求、动物疫病诊断技术执行规程,2017～2020年对眉县地区11个镇街共抽检血清样品5343份,采用正向间接血凝抗体试验、酶联免疫吸附试验、血凝与血凝抑制试验分别对猪O型口蹄疫、牛O型口蹄疫、羊O型口蹄疫、鸡新城疫、鸡高致病性禽流感的免疫抗体进行检测,分析不同年份、不同季节、不同区域的免疫抗体合格率,获得如下研究结果。1.眉县地区不同年份中,2017～2020年猪、牛、羊O型口蹄疫、新城疫、高致病性禽流感5种疫病免疫抗体合格率分别为:84.34%、97.88%、90.69%、93.94%和96.13%,均高于国家免疫抗体合格率70%的要求,相对于其他4个病种,猪O型口蹄疫还有待进一步加强。2.2017～2020年眉县地区不同季节中,春季猪、牛、羊O型口蹄疫、新城疫、高致病性禽流感5种疫病免疫抗体合格率分别为:94.75%、99.06%、88.96%、92.73%、93.73%,秋季猪、牛、羊O型口蹄疫、新城疫、高致病性禽流感5种疫病免疫抗体合格率分别为:88.99%、100%、100%、95.67%、95.82%。秋季5种疫病免疫抗体合格率高于春季的,但差异不显着。3.2017～2020年眉县地区不同区域中,连续4年5种疫病免疫抗体全部合格的镇街有5个:青化、横渠、首善、常兴、金渠,4个病种免疫抗体合格的镇街2个:齐镇、马家,3个病种免疫抗体合格的镇街有3个:小法仪、汤峪、槐芽（均无牛）,1个病种免疫抗体合格的有1个镇街:营头。对于不达标的镇街,涉及相关不达标的疫病,要及时进行补免,筑牢县域动物疫病防控屏障。
陈莹[2]（2020）在《凤翔县主要动物疫病免疫效果的检测与分析》文中进行了进一步梳理凤翔县是宝鸡市的畜牧业大县,为了掌握全县主要动物疫病免疫效果,选择猪瘟、猪和羊O型口蹄疫、鸡新城疫4种动物疫病,2018、2019年进行为期两年的调研,分析其免疫效果,以期及时发现和解决全县防疫工作存在的问题。对2018年抽检的1500份畜禽血清进行抗体检测,分析检测结果发现,2018年凤翔县猪瘟、猪O型口蹄疫、羊O型口蹄疫、鸡新城疫4种动物疫病免疫抗体阳性率分别为88.9%、86.0%、88.4%、76.5%,均>70%,达到农业农村部标准,但鸡新城疫抗体阳性率水平较低,仅为76.5%。12个乡镇四种疾病免疫抗体检测平均阳性率均超过了70%的国家标准,且存在显着差异,其中田家庄、糜杆桥、柳林、范家寨四镇的防疫工作相对薄弱,四种疫病免疫抗体检测阳性率均值分别为84.4%、79.1%、77.6%、79.4%,四种疫病免疫抗体检测阳性率P值分别为0.0247、0.0399、0.0473、0.1034,均排在末位。3个不同检测点抽检的免疫抗体阳性率,规模场为91.3%,市场为86.7%,散养户为83.6%,规模养殖场的免疫抗体阳性率最高,散养户的免疫抗体阳性率最低。在2019年防疫工作中,全县加强鸡新城疫的防疫,对免疫薄弱乡镇进行防疫整改,散养户提升免疫措施。通过改进,2019年猪瘟、猪O型口蹄疫、羊O型口蹄疫、鸡新城疫4种疾病免疫抗体阳性率分别为90.6%、88.5%、89.8%、83.5%,都较2018年有所提升,猪瘟、猪O型口蹄疫、羊O型口蹄疫三种疫病免疫抗体阳性率分别提高了1.7%、2.5%、1.4%,幅度较小,而鸡新城疫免疫抗体阳性率较上一年提高了7%,幅度相对最大。2018年免疫水平排名末位的田家庄、糜杆桥、柳林、范家寨,2019年均提升到了全县中等水平,改进效果显着。2019年规模场、散养户、市场抽检免疫抗体合格率分别为91.8%、87.1%、88.4%。较2018年均有所提高,其中规模场提升了0.5%,市场提升了1.7%,幅度较小,而散养户提升了3.5%,提升幅度最明显。通过对凤翔2018年4种主要动物疫病检测结果进行分析,发现了不同疫病种类、不同乡镇、不同养殖规模三方面存在的具体问题,在2019年的免疫工作中进行针对性改进,2019年抽检结果显示之前存在的问题均得到显着改善。这一研究为全县动物疫病的科学防疫提供了数据支撑和技术保障,可在今后的防疫工作中为解决类似问题提供参考思路。
徐端红,路红卫[3]（2019）在《非典型性鸡新城疫的诊断、预防与治疗》文中认为非典型新城疫常发生于有一定抗体水平的且遭受强毒攻击的免疫鸡群,发病率和死亡率都不高,病情缓和,以鸡只零星死亡、生长发育迟缓、产蛋率和蛋品质下降、病理解剖症状不典型等为特征,须结合实验室诊断才能最终确诊。病毒存在于病鸡的所有组织器官、分泌物及排泄物中,以脑、脾、肺等器官含病毒量最高,以骨髓含毒时间最长。饲养管理、防疫消毒和免疫监测等各个环节的有效结合可防止该病的发生。综合防控的关键措施是监测鸡群HI抗体水平的免疫状态。
杜娟[4]（2019）在《畜禽养殖业排泄物的污染及防治对策》文中进行了进一步梳理重视畜禽排泄物污染问题是实现畜牧业可持续发展的前提,为防止畜禽粪尿污染,保护环境,构建和谐生态,通过我国畜禽排泄物污染的现状,分析造成环境污染的原因及其危害,探究如何防治污染的有效对策。
李佩瑶[5]（2019）在《赛鸽新城疫病毒的分离鉴定及HB株灭活疫苗研究与应用》文中认为鸽新城疫是由鸽Ⅰ型副粘病毒引起的高接触性传染病,由于赛鸽“集鸽”模式及训放等原因导致该病在鸽群中的流行。目前免疫预防主要采用鸡新城疫疫苗,由于基因型的差异,导致保护率偏低。鉴于上述原因,本研究从赛鸽中分离典型致病性毒株,开展灭活疫苗的相关研究,拟为赛鸽新城疫的防控提供借鉴。本研究从河北、内蒙以及天津等赛鸽公棚送检病料进行新城疫病毒分离、鉴定及致病性试验。选择典型致病性分离毒株进行毒力测定及相关疫苗研究与应用。结果显示:本研究共分离到5株新城疫病毒;其中河北分离毒株在人工感染致病性试验中表现典型新城疫临床症状及剖检变化,死亡率为100%;其MDT为52.8 h,ICPI为1.78,IVPI为2.59,命名为HB株。经基因序列测定及推导氨基酸序列显示该毒株F蛋白的裂解位点为112R-R-Q-K-R-F117,符合新城疫强毒株特点,其基因型为Ⅵ型。本试验测得该疫苗使用的病毒最佳灭活条件为:0.1%甲醛、灭活温度为37℃、灭活时间16h;理想佐剂为法国进口水佐剂。经过安全性、最佳免疫剂量、抗体产生时间、免疫持续期、保存期试验等表明颈部皮下接种0.3ml/只,第7天开始产生抗体,2周后平均抗体效价达到26,4周时达到峰值29,在免疫后90d进行强毒攻击的保护率为100%。临床应用显示该疫苗对鸽新城疫具有较好的防控效果。
吴宇颖[6]（2018）在《中山市三角镇畜禽疫病防疫情况调查分析》文中进行了进一步梳理广东省有良好的地理位置和环境,适合养殖业的发展,再加上其制造业发达,吸引了很多外来务工人员,肉蛋奶的市场需求量很大。2016年,广东省畜牧业生产总值达到了1221.80亿元,肉类和蛋类总产量分别在全国第8位和第18位（国家统计局,2016）。三角镇的畜禽养殖历史悠久,是中山市重要的养殖重镇,但是目前在农村基层多数以农户为单位,养殖形式分散,统一管理难度较大,各类畜禽疫病情还是时有发生,鸡禽流感疫情更是有多次严重发生,肉鸡养殖业损失惨重,严重影响了畜禽养殖业的健康发展,影响了畜牧业经济的增长和农民增收,降低了动物来源食品的安全性。面对当前形势,笔者以中山市三角镇为研究范围,通过查阅图书馆文献、书籍等相关资料,并调查走访了三角镇兽医站和村级防疫站等部门,分别收集中山市三角镇近五年来（2013～2017年）生猪和肉鸡的主要养殖品种、出栏数量、存栏数量、养殖场数量、疫病发生种类、发病数量、死亡数量、免疫注射种类和数量等一系列数据,了解该镇近五年来畜禽养殖业发展和疫病防控工作进展情况。另外,通过调查统计兽医站近年来的人员配备、防疫人员的年龄学历、防疫防控投入资金,以及防控疫苗和药品的采购、运输、储存、使用等基本情况,运用文献分析法、调查研究法、综合分析法等得出研究结论。调查发现,2013～2017年三角镇的畜禽养殖品种为高端大花白猪、麻黄鸡和沙栏鸡,重点防控疫情为猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪链球菌病、鸡新城疫、禽流感、马立克病、传染性法氏囊病等,各类疫病免疫率在65%～100%,五年间主要发生的疫情为2014年发生的禽流感。而三角镇防疫工作在各方面还存在很多问题亟待改进,包括防疫人员少、专业型人才极度缺乏、防疫体制不健全、疫病追溯困难、疫苗储存不规范、病死畜无害化处理设施不全等。针对所发现的问题,结合三角镇实际情况,建议应从加大对养殖户的宣传培训、提高防疫人员的整体素质、加大基层防疫资金投入、加大畜禽养殖监管和行政处罚力度、建立健全重大疫情监控体系、建立动物疫病可追体系、建立健全重大动物疫病应急处理机制等几方面着手,构建完整的基层畜禽疫病防控网络,以促进三角镇及整个中山市的畜禽养殖业健康发展。
田亚凯[7]（2017）在《枯草菌肽可溶性粉对鸡新城疫疫苗免疫增强作用的研究》文中研究表明新城疫病毒是一种高度传播性的病原,感染家禽后会引起很高的发病率和死亡率。目前阻止和控制新城疫快速传播的主要方法是接种疫苗,但仅使用疫苗不能发挥很好的效果,免疫增强剂的联用可以使疫苗产生更好的免疫应答,使疫苗提供更长时间的保护。本试验的目的是筛选出枯草菌肽可溶粉（KSP）提高鸡新城疫抗体水平时的适宜剂量,探索枯草菌肽提高鸡新城疫疫苗免疫效果的作用机制。通过两个批次的剂量筛选试验筛选出枯草菌肽可溶粉提高鸡新城疫抗体水平时的适宜剂量和其对生长性能的影响。第一个批次试验分为油苗组（IVG）、活苗组（LVG）、油苗和活苗联用组（CVG）的三种不同免疫类型组;每个不同免疫类型组又分了高(500mgL-1)、中(100mgL-1)、低(20mgL-1)三个剂量组和一个对照组（VC）,自由饮水给药,连续用药10天,通过血凝抑制试验（HI）测定鸡新城疫抗体水平。在第二批次试验中,试验鸡随机分成10组,除空白对照组（BC）外,其余9组在11日龄免疫新城疫疫苗,并在25日龄再次免疫新城疫疫苗（不包括空白对照组和单次免疫用药组）。在11、18、25、32、39和43日龄,测定新城疫抗体水平和生长性能。通过体外试验和体内试验探索枯草菌肽可溶粉提高鸡新城疫疫苗免疫效果及其作用机制。在体外试验中,使用MTT方法测定KSP对T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖的影响;在体内试验中,450只14日龄的鸡随机分为七组,除去空白对照组,各组在14日龄免疫新城疫疫苗,在28日龄再次免疫（除去空白对照组）,在第一次免疫的同时,KSP高剂量组(KSPH,100mgL-1)、KSP中剂量组(KSPM,50mgL-1)、KSP低剂量组(KSPL,25mgL-1)和紫锥菊口服液对照组(EOL,1.5mgL-1)、无关肽对照组(PSC,100mgL-1)通过自由饮水给药,均连用10天;免疫对照组（VC）和空白对照组（BC）中的试验鸡饮用自来水作阴性对照。在14、21、28、35、42日龄时,血清学方法测定试验鸡的抗体滴度;在13、24、39日龄时,用MTT法测定T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖,采用流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群变化的情况;在14、21、36、43日龄时,用ELISA法检测试验鸡血清中的细胞因子（IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ）的含量;在25和40日龄时,用中性红摄入法测定试验鸡腹腔巨噬细胞的吞噬功能和用称重法测定试验鸡的免疫器官指数。1、第一批次剂量筛选试验结果表明:KSP合适的剂量范围在20mgL-1左右,而且使用油苗和活苗联用的效果最好,但都对试验鸡的生长性能没有明显的影响。第二批次剂量筛选试验结果表明:KSP在最高浓度2500mgL-1时,对新城疫抗体水平有明显的免疫抑制作用;KSP的浓度50mgL-1时,新城疫抗体滴度在多数情况下都显着高于对照组（p<0.05）,用药两次和用药一次差异不显着（P>0.05）,这表明KSP在合适浓度可以显着提高新城疫疫苗的免疫效果,但都未能改善肉鸡的生长性能。2、正式试验的体外试验结果表明:在T淋巴细胞分裂原ConA的协助下,KSP浓度为62.5–1000μg ml-1时测得的A570值显着高于KSP浓度为0时的A570值,说明KSP可以显着刺激T淋巴细胞增殖（p<0.05）;在B淋巴细胞分裂原LPS的协助下,KSP浓度为15.63–1000μg ml-1时测得的OD值显着高于KSP浓度为0时的A570值,说明KSP可以显着刺激B淋巴细胞增殖（p<0.05）,且KSP浓度均为1000μg ml-1时效果最好。3、在正式试验的体内试验中:新城疫抗体测定结果表明,除14日龄外,KSPH、KSPM和KSPL组试验鸡的抗体滴度在其余各检测时间点均显着高于对照组（p<0.05）,KSPH和KSPM组试验鸡的抗体滴度显着高于无关肽（PSC）对照组（p<0.05）;T淋巴细胞增殖试验检测结果表明,不同日龄各组样品的A570值无显着差异（P>0.05）;B淋巴细胞增殖试验检测结果表明,在试验鸡24日龄时KSPH和KSPM组样品的A570值显着高于对照组（p<0.05）,在试验鸡39日龄时KSPH、KSPM和KSPL组样品的A570值显着高于对照组（p<0.05）;T淋巴亚群检测检测结果表明,不同日龄各组样品的CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、CD4+/CD8+的比值差异不显着（P>0.05）;细胞因子（IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ）检测结果表明,除试验鸡36日龄时KSPH和KSPM组血清样品中IL-4的含量显着高于对照组外,其余不同日龄的各组样品中IL-2、IL-10和IFN-γ的含量差异不显着（P>0.05）;腹腔巨噬细胞吞噬能力检测结果表明,在25日龄时KSPH、KSPM和KSPL组试验鸡的A570值显着高于对照组（p<0.05）,在39日龄时KSPH和KSPM组试验鸡的鸡的A570值显着高于对照组（p<0.05）;免疫器官指数检测结果表明,在25日龄时KSPH和KSPM组试验鸡的脾脏指数和法氏囊指数显着高于对照组（p<0.05）,KSPH、KSPM和KSPL组试验鸡的胸腺指数显着高于KSPL组和对照组（p<0.05）;在39日龄时KSPH和KSPM组试验鸡的脾脏指数显着高于VC组（p<0.05）,各组的法氏囊指数和胸腺指数差异不显着（P>0.05）。本次研究不仅筛选出了枯草菌肽可溶粉提高鸡新城疫抗体水平时的合适剂量为50mgL-1,也论证了枯草菌肽可溶粉是通过增加试验鸡血清中抗体滴度、促进淋巴细胞增殖、提高吞噬细胞活性和免疫器官指数等途径增强新城疫疫苗免疫效果,表明其可以成为一种新型的免疫增强剂。
苏琪[8]（2016）在《西安市鸡新城疫免疫抗体水平调查与分析》文中研究说明新城疫（Newcastle disease,ND）是由新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）引起的禽类以呼吸困难、流涎、甩头、腹泻、神经机能紊乱、纤维乳头出血等为特征的急性和高接触性A类传染病。ND的传播非常迅速,死亡率也很高,为全世界所公认的严重损害养禽业的最主要传染病之一。尽管我国对鸡新城疫防控极为重视,并采取了较严格的全面免疫接种,但由于种种原因,ND仍然分布广泛,危害较为严重。为更好地了解全面免疫后,鸡群抗体产生情况和抗体滴度分布规律,本研究对西安市不同区县、不同来源的鸡新城疫进行了免疫抗体监测。从2011到2015年,从西安市下辖的未央区、高陵区、长安区、灞桥区、阎良区、户县、周至县及蓝田县等区县共采集血样3465份,涉及规模以上养鸡场120个,散养户10个,畜禽交易市场3个,其中合格样品3227份。对采集来的血样分离血清,采用血凝试验和血凝抑制试验检测抗体滴度,对监测结果按照不同类别进行分类统计。结果表明,从2011年到2015年,西安市春秋两季新城疫免疫抗体合格率均达到了70%以上,平均合格率为93%,免疫效果良好。根据五年的数据和不同季节监测免疫抗体合格率。检测结果表明经过合理免疫程序和规范操作,全面免疫后鸡群抗体保护水平较高,可以作为参考程序进行推广。
马犇[9]（2016）在《检测TMU、IB和ND病毒多重PCR方法的建立及应用》文中认为鸭坦布苏病毒（TMUV）是一种在2010年新发现的病毒,引发鸭产蛋下降、生长阻滞、甚至死亡。近年来,也发现这种病毒感染鸡,对养鸡业造成一定损失,且出现的症状与其它呼吸道病原的感染有许多相似之处。引起鸡呼吸道疾病的病原还有新城疫病毒（NDV）、传染性支气管炎病毒（IBV）、禽流感病毒（AIV）等。目前在很多地区出现了与TMUV的混合感染病例,依靠临床症状已经不能鉴别诊断这几种病原的多重感染。此外,鸡群中也经常存在同一个体在同一时间受到不同的病毒感染的情况。所以,如果能同时检测同一份病料中不同的种类的病毒,将对流行病学调查以及疫病的鉴别诊断起到非常重要的作用。本研究建立了NDV、IBV、TMUV3种禽类病毒的多重PCR检测方法。通过生物信息学的分析,设计了针对这3种病毒的特异性引物,对PCR的反应条件进行了退火温度与引物浓度的梯度优化,结果显示引物浓度在0.110 pmol/μL,退火温度53℃或56℃时,能够清晰扩增出3个病毒基因的条带,分别为386 bp（IBV）,588 bp（NDV）和821bp（TMUV）。建立的多重PCR方法能够准确的扩增出三种病原（NDV、IBV和TMUV）的核酸片段,且没有扩增出其他病原的特异性片段。表明此方法对上述三种病原的检测有很好的特异性。同时,该多重PCR检测方法能同时检测到的NDV、IBV、TMUV三种病毒目的基因的最小浓度分别为1.79 ng/μL、125pg/μL、23.4 pg/μL,表明该多重PCR检测方法具有较高的敏感性。随后,将本试验建立的多重PCR检测方法对收集的一些临床样本进行检测,可检测出TMUV、IBV、NDV的单独感染及TMUV、IBV与NDV的混合感染,与经典的鸡胚分离培养结果基本吻合。最后,通过对临床样本的PCR产物进行测序从分子生物学角度验证了本实验结果的准确性。本研究成功建立了多重PCR检测三种禽类病毒的方法,为有效预防、控制和扑灭这些禽类动物的疫病提供技术支撑。
丽牧[10]（2015）在《新型荧光实时定量检测新城疫病毒方法的建立及其在鸡肉食品安全控制中的应用》文中提出新城疫是由新城疫病毒引起、侵害对象主要为鸡和火鸡的一种急性、热性、败血性、接触性传染病。因新城疫的普遍存在性,以及四季均可发生的流行性,现已成为危害世界禽类养殖最严重的疾病之一。因此,对新城疫进行流行病学检测,以及对其疑似病例做出快速而准确的诊断,进而掌控新城疫的遗传变异规律,对于保护消费者的生命安全,发展禽类养殖业以及减少经济损失具有非常重要意义。新城疫病毒传统的确诊方法主要依赖病毒的分离鉴定及血清学检测（主要包括鸡胚中和试验、琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验等方法）,这些方法通常耗时长、灵敏度低且经验依赖性强。在中国,根据新城疫诊断的国家标准要求,新城疫病毒的主要检测方有:临床诊断、血凝试验、血凝抑制试验、致病指数测定、反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）五种检测方法.但其中临床诊断法受疑似感染病例的不同而存在较大个体差异,同时检测人员的诊断经验与观察习惯都对诊断结果有很大影响。因此临床诊断只能作为新城疫病毒疑似病例的初步判断。而血凝、血凝抑制和致病指数测定都存在实验操作复杂、实验周期长、假阳性率较高的缺点。反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测方法是一种快速准确的检测方法,但产物需经琼脂糖凝胶电泳和EB染色等,易产生污染和假阳性.在禽类养殖的迅速发展的当下,需要建立一种快速、准确、高效的检测方法,以及时发现和控制保护消费者食用安全,减少经济损失。本研究所建立针对于新城疫病毒的Taq man 一步法QRT-PCR检测方法是在传统RT-PCR检测方法的基础上添加Taq man荧光探针,通过利用荧光定量PCR仪对荧光信号的收集来实现对PCR的全程实时检测,最终结果通过制定标准曲线对未知浓度的模板实行定量解析。通过本研究证明该方法相较于传统方法而言具有更高的灵敏度,特异性和更强的稳定性。本研究还将建立及优化后的检测方法应用于临床样品检测。经过与传统方法的对比检测结果,证明该方法可以用于临床样品的检测。本研究分为两个部分进行研究:新城疫病毒一步法QRT-PCR检测条件优化。将新城疫病毒标准样品通过SPF鸡胚培养法进行培养并提取,在检测其纯度与完整性合格后用作检测模板。通过查阅相关文献,设计一对新城疫病毒的特异性引物与探针,在基础反应体系的上,通过筛选确定四项优化因素:逆转录酶、dNTP、Mg2+、Taq酶,利用正交试验确定每种因素的最优反应条件及个因素之间交互作用,并建立针对新城疫病毒检测的一步法qRT-PCR检测条件.新城疫病毒新型荧光实时定量检测试剂的组装及研制。在第一部分检测方法及各项条件优化的基础上,研制了一种城疫病毒新型荧光QRT-PCR检测试剂盒,对组装的试剂盒进行了各项指标如特异性、稳定性、灵敏度、重复性、保存期等的验证性试验,获得了丰富的试验数据。此外,将符合质量要求的试剂盒应用于实验室的临床样品检测,获得了重要的临床应用数据。这些研究数据都充分证明了本研究所组装的新城疫病毒荧光定量RT-PCR检测试剂盒具有快速简便、灵敏度高、特异性强、检测性能稳定等优点,在我国新城疫病毒的检测与检测中具有巨大的应用价值,可推广使用。
二、新城疫实验室诊断技术研究进展（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、新城疫实验室诊断技术研究进展（论文提纲范文）
（1）2017-2020年眉县5种动物疫病免疫抗体检测与分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要符号对照表 |
| 文献综述 |
| 第一章 口蹄疫、新城疫以及高致病性禽流感研究进展 |
| 1.1 口蹄疫 |
| 1.1.1 概述 |
| 1.1.2 流行病学 |
| 1.1.3 临床症状 |
| 1.1.4 病理变化 |
| 1.1.5 诊断技术 |
| 1.1.6 免疫方法 |
| 1.2 鸡新城疫 |
| 1.2.1 概述 |
| 1.2.2 流行病学 |
| 1.2.3 临床症状 |
| 1.2.4 病理变化 |
| 1.2.5 诊断技术 |
| 1.2.6 免疫方法 |
| 1.3 高致病性禽流感 |
| 1.3.1 概述 |
| 1.3.2 流行病学 |
| 1.3.3 临床症状 |
| 1.3.4 病理变化 |
| 1.3.5 诊断技术 |
| 1.3.6 免疫方法 |
| 1.4 研究的目的及意义 |
| 试验研究 |
| 第二章 2017~2020 年眉县地区O型口蹄疫免疫抗体水平检测与分析 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 试验方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 不同年份猪、牛、羊O型口蹄疫免疫抗体抽样检测结果 |
| 2.2.2 2017 年~2020 年不同季节猪、牛、羊O型口蹄疫免疫抗体抽样检测结果 |
| 2.2.3 不同区域以及不同年份猪、牛、羊O型口蹄疫免疫抗体抽样检测分析 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 眉县不同年份猪、牛、羊O型口蹄疫免疫抗体抽样检测结果的讨论 |
| 2.3.2 2017~2020 年眉县不同季节猪、牛、羊O型口蹄疫免疫抗体抽样检测结果的讨论 |
| 2.3.3 2017~2020 年眉县不同区域猪、牛、羊O型口蹄疫免疫抗体抽样检测结果的讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 2017~2020 年眉县地区新城疫及高致病性禽流感免疫抗体水平监测与分析 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验材料 |
| 3.1.2 试验方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 不同年份新城疫、高致病性禽流感免疫抗体抽样检测结果 |
| 3.2.2 不同季节新城疫、高致病性禽流感免疫抗体抽样检测分析 |
| 3.2.3 不同区域以及不同年份鸡新城疫、高致病性禽流感免疫抗体抽样检测分析 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 眉县不同年份新城疫、高致病性禽流感免疫抗体抽样检测结果的讨论 |
| 3.3.2 2017~2020 年眉县不同季节新城疫、高致病性禽流感免疫抗体抽样检测结果的讨论 |
| 3.3.3 2017~2020 年眉县不同区域新城疫、高致病性禽流感免疫抗体抽样检测结果的讨论 |
| 3.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
| 附件 |
（2）凤翔县主要动物疫病免疫效果的检测与分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 猪瘟、口蹄疫、新城疫的免疫现状 |
| 1.1 猪瘟 |
| 1.1.1 概述 |
| 1.1.2 病理变化 |
| 1.1.3 诊断 |
| 1.1.4 猪瘟的免疫方法 |
| 1.1.5 猪瘟的免疫现状 |
| 1.2 猪O型口蹄疫 |
| 1.2.1 概述 |
| 1.2.2 病理变化 |
| 1.2.3 诊断 |
| 1.2.4 猪O型口蹄疫的免疫方法 |
| 1.2.5 猪O型口蹄疫的免疫现状 |
| 1.3 羊O型口蹄疫 |
| 1.3.1 概述 |
| 1.3.2 病理变化 |
| 1.3.3 诊断 |
| 1.3.4 羊O型口蹄疫的免疫方法 |
| 1.3.5 羊O型口蹄疫的免疫现状 |
| 1.4 鸡新城疫 |
| 1.4.1 概述 |
| 1.4.2 病理变化 |
| 1.4.3 诊断 |
| 1.4.4 鸡新城疫的免疫方法 |
| 1.4.5 鸡新城疫的免疫现状 |
| 1.5 凤翔动物疫病防控现状 |
| 1.6 本研究的目的和意义 |
| 第二章 2018年凤翔县主要动物疫病免疫效果的检测与分析 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.1.1 血清样品来源与分布 |
| 2.1.1.2 主要试剂 |
| 2.1.1.3 主要仪器设备 |
| 2.1.2 方法 |
| 2.1.2.1 样品采集方法 |
| 2.1.2.2 样品处理 |
| 2.1.2.3 检测方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 2018年不同疫病免疫抗体检测结果 |
| 2.2.2 2018年不同乡镇免疫抗体检测结果 |
| 2.2.3 2018年不同养殖规模免疫抗体检测结果 |
| 2.3 2018年免疫效果差异的原因分析 |
| 2.3.1 不同疫病的免疫效果分析 |
| 2.3.2 不同乡镇的免疫效果分析 |
| 2.3.3 不同规模养殖场的免疫效果分析 |
| 2.4 2018年主要动物疫病免疫存在的问题 |
| 2.4.1 2018年鸡新城疫的免疫合格率低 |
| 2.4.2 2018年一些乡镇的免疫效果不理想 |
| 2.4.3 2018年散养户的免疫效果较差 |
| 第三章 2019年凤翔县主要动物疫病免疫效果的改进研究 |
| 3.1 2019年四种主要动物疫病免疫工作的改进 |
| 3.1.1 加强鸡新城疫的免疫 |
| 3.1.2 对免疫效果不理想的乡镇进行动物防疫整体提升 |
| 3.1.3 注重对散养户的免疫监管 |
| 3.2 改进后的免疫效果 |
| 3.2.1 2019年不同疫病免疫抗体检测结果 |
| 3.2.2 2019年不同乡镇免疫抗体检测结果 |
| 3.2.3 2019年不同养殖规模免疫抗体检测结果 |
| 3.3 改进后的免疫效果分析 |
| 3.3.1 鸡新城疫的免疫效果变化 |
| 3.3.2 免疫工作薄弱乡镇的免疫效果变化 |
| 3.3.3 散养户免疫效果变化 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）非典型性鸡新城疫的诊断、预防与治疗（论文提纲范文）
| 一、非典型性鸡新城疫发病特征 |
| 二、临床症状 |
| 三、病理剖检症状 |
| 四、实验室诊断 |
| （一）血清学诊断技术 |
| （二）分子生物学诊断技术RT-PCR |
| 五、综合防治措施 |
| （一）加强饲养管理。 |
| 1、注意通风换气。 |
| 2、加强饮水管理。 |
| 3、加强光照管理。 |
| 4、注意防寒保暖。 |
| 5、加强饲养管理。 |
| （二）科学免疫 |
| （三）加强抗体检测 |
| （四）合理使用抗生素，保证生物安全 |
（4）畜禽养殖业排泄物的污染及防治对策（论文提纲范文）
| 1 畜禽排泄物污染现状 |
| 1.1 我国畜禽排泄物总量概况 |
| 1.2 畜禽排泄物污染环境的原因 |
| 2 畜禽排泄物污染的危害分析 |
| 2.1 对水体的危害 |
| 2.2 对土壤的危害 |
| 2.3 对大气的危害 |
| 2.4 传播人畜共患病 |
| 3 畜禽排泄物污染的防治对策 |
| 3.1 加强行政执法,通过政策法规控制污染 |
| 3.2 科学规划,合理布局 |
| 3.3 科学调配饲料,降低污染 |
| 3.4 规范各种药物、添加剂及消毒剂的使用 |
| 3.5 畜禽排泄物的资源化利用 |
| 4 结论 |
（5）赛鸽新城疫病毒的分离鉴定及HB株灭活疫苗研究与应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 国内赛鸽养殖及防控情况 |
| 1.2 鸽新城疫的研究概况 |
| 1.3 鸽新城疫疫苗的概况 |
| 1.4 研究目的与意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 第三章 结果与分析 |
| 3.1 病毒分离鉴定 |
| 3.2 致病性试验 |
| 3.3 HB 株毒力测定 |
| 3.4 分子特征 |
| 3.5 灭活条件的筛选 |
| 3.6 疫苗效力评价 |
| 3.7 大田试验 |
| 3.8 临床应用 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 个人简历 |
（6）中山市三角镇畜禽疫病防疫情况调查分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词或符号表 |
| 1 引言 |
| 1.1 猪常见的几种疫病及其防控措施 |
| 1.1.1 猪繁殖与呼吸综合征 |
| 1.1.2 经典猪瘟 |
| 1.2 肉鸡主要疫病概述及防控措施 |
| 1.2.1 鸡新城疫 |
| 1.2.2 鸡球虫病 |
| 1.3 我国畜禽养殖业存在的问题 |
| 1.3.1 养殖户的观念问题 |
| 1.3.2 防疫机构及人员的问题 |
| 1.3.3 疫苗的问题 |
| 1.3.4 养殖环境问题 |
| 1.3.5 相关部门的管理及监督问题 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 相关材料 |
| 2.1.1 图书馆书籍和相关资料 |
| 2.1.2 数据库及媒体资料 |
| 2.1.3 相关管理部门资料 |
| 2.1.4 实地调研资料 |
| 2.2 研究方法 |
| 2.2.1 文献归纳法 |
| 2.2.2 调查研究法 |
| 2.2.3 综合分析法 |
| 3 调查结果及分析 |
| 3.1 广东省中山市三角镇基本情况 |
| 3.2 中山市三角镇近五年(2013年~2017年)生猪养殖及疫病防控情况 |
| 3.2.1 主要养殖品种及生猪出栏情况 |
| 3.2.2 生猪免疫情况及疫病发生情况 |
| 3.3 中山市三角镇近五年(2013年~2017年)肉鸡养殖和疫病防控情况 |
| 3.3.1 主要养殖品种及养殖数量 |
| 3.3.2 肉鸡免疫情况及疫病发生情况 |
| 3.4 中山市三角镇防疫机构基本情况 |
| 3.4.1 防疫人员构成情况 |
| 3.4.2 防疫人员薪资情况 |
| 3.4.3 2013年~2017年三角镇防疫投入资金情况 |
| 3.4.4 疫苗使用情况 |
| 4 结论与建议 |
| 4.1 三角镇畜禽养殖及防疫现状调查结论 |
| 4.2 关于基层防疫体系建设的建议 |
| 4.2.1 加大对养殖户的宣传培训力度 |
| 4.2.2 提高防疫员的整体素质 |
| 4.2.3 加大对基层防疫的资金投入 |
| 4.2.4 加大畜禽养殖监管和行政处罚力度 |
| 4.2.5 建立健全重大疫情监控体系 |
| 4.2.6 建立动物疫病可追溯体系 |
| 4.2.7 建立健全重大动物疫病应急处理机制 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
（7）枯草菌肽可溶性粉对鸡新城疫疫苗免疫增强作用的研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 抗菌肽研究综述 |
| 1.1 抗菌肽的概念 |
| 1.2 抗菌肽的分类 |
| 1.3 抗菌肽的生物活性 |
| 1.3.1 抗菌肽的抗菌活性 |
| 1.3.2 抗菌肽的抗病毒活性 |
| 1.3.3 抗菌肽的抗真菌活性 |
| 1.3.4 抗菌肽的抗肿瘤活性 |
| 1.3.5 抗菌肽具有促进创伤愈合的活性 |
| 1.3.6 抗菌肽调节炎性的活性 |
| 1.4 抗菌肽对机体免疫的影响 |
| 1.4.1 宿主的抵抗力与抗菌肽的表达有关 |
| 1.4.2 抗菌肽可以促进淋巴细胞的增殖 |
| 1.4.3 抗菌肽对趋化因子的影响 |
| 1.4.4 抗菌肽可以影响吞噬细胞的活性 |
| 1.4.5 抗菌肽可以调节特异性免疫 |
| 1.5 抗菌肽的构建和筛选 |
| 1.5.1 从天然物质中筛选抗菌肽 |
| 1.5.2 用分子生物学方法筛选抗菌肽 |
| 1.5.3 抗菌肽的修饰 |
| 1.6 抗菌肽的应用前景 |
| 1.6.1 抗菌肽作为新型抗菌药物 |
| 1.6.2 抗菌肽在临床药物上的应用 |
| 1.6.3 抗菌肽在食品业的应用 |
| 2 新城疫病毒概述 |
| 2.1 NDV的生物学特点 |
| 2.2 新城疫的流行趋势 |
| 2.3 新城疫的诊断技术和防控措施 |
| 3 本试验的目的和意义 |
| 第二章 不同剂量KSP对鸡新城疫抗体水平和生长性能影响的研究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 疫苗和药物 |
| 1.2 试验动物 |
| 1.3 试验设计 |
| 1.3.1 第一批次试验设计 |
| 1.3.2 第二批次试验设计 |
| 1.4 新城疫抗体的测定 |
| 1.5 统计分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 第一批次试验鸡新城疫抗体检测结果 |
| 2.1.1 第一批次活苗组抗体结果 |
| 2.1.2 第一批次油苗组抗体结果 |
| 2.1.3 第一批次油苗组+活苗组抗体结果 |
| 2.2 第一批次试验鸡体重变化结果 |
| 2.2.1 第一批次活苗组体重结果分析 |
| 2.2.2 第一批次油苗组体重结果分析 |
| 2.3 第二批次试验鸡抗体结果分析 |
| 2.4 第二批次试验鸡体重结果分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三章 KSP对鸡新城疫免疫增强作用机制的研究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 药物和疫苗 |
| 1.1.2 试验动物 |
| 1.1.3 试验试剂 |
| 1.1.4 试验器材 |
| 1.1.5 试验试剂的配制 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 体外淋巴细胞增殖试验 |
| 1.3 体内试验 |
| 1.3.1 体内试验设计 |
| 1.3.2 新城疫抗体的测定方法 |
| 1.3.3 鸡外周血T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖试验方法 |
| 1.3.4 鸡外周血T淋巴细胞亚群检测方法 |
| 1.3.5 细胞因子IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的检测方法 |
| 1.3.6 鸡腹腔巨噬细胞的吞噬功能测定方法 |
| 1.3.7 免疫器官指数检测方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 体外试验结果 |
| 2.1.1 体外KSP刺激T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖试验结果 |
| 2.2 体内试验结果 |
| 2.2.1 新城疫抗体水平检测结果 |
| 2.2.2 KSP对鸡淋巴细胞增殖试验的结果 |
| 2.2.2.1 KSP对鸡T淋巴细胞增殖的影响 |
| 2.2.2.2 KSP对鸡B淋巴细胞增殖的影响 |
| 2.2.3 鸡外周血T淋巴细胞亚群检测结果 |
| 2.2.4 鸡细胞因子中IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的检测结果 |
| 2.2.4.1 鸡细胞因子中IL-2(白介素-2)的检测结果 |
| 2.2.4.2 鸡细胞因子中IL-4(白介素-4)的检测结果 |
| 2.2.4.3 鸡细胞因子中IL-10(白介素-10)的检测结果 |
| 2.2.4.4 鸡细胞因子中IFN-γ(干扰素-γ)的检测结果 |
| 2.2.5 鸡腹腔巨噬细胞吞噬功能试验的结果 |
| 2.2.6 免疫器官指数试验结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 KSP对试验鸡新城疫抗体水平影响的探讨 |
| 3.2 关于免疫对照药物选择的探讨 |
| 3.3 KSP对试验鸡T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖影响的探讨 |
| 3.4 KSP对试验鸡T淋巴细胞亚群影响的探讨 |
| 3.5 ASP对试验鸡细胞因子(IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ)影响的探讨 |
| 3.6 KSP对试验鸡腹腔巨噬细胞吞噬功能影响的探讨 |
| 3.7 KSP对试验鸡免疫器官指数影响的探讨 |
| 4 小结 |
| 全文结论 |
| 本文创新点 |
| 参考文献 |
| Abstract |
（8）西安市鸡新城疫免疫抗体水平调查与分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 文献综述 新城疫研究进展 |
| 1.1 新城疫的流行情况 |
| 1.2 新城疫的流行病学 |
| 1.3 新城疫病毒研究进展 |
| 1.3.1 病原分类 |
| 1.3.2 形态结构和理化特性 |
| 1.3.3 病毒的分子生物学特性 |
| 1.3.3.1 病毒的基因型 |
| 1.3.3.2 病毒的结构蛋白 |
| 1.3.4 病毒的复制与致病机理 |
| 1.3.5 病毒的生物学特性 |
| 1.3.5.1 血凝特性 |
| 1.3.5.2 神经氨酸酶活性 |
| 1.3.5.3 细胞融合性与溶血活性 |
| 1.4 新城疫的临床症状与病理变化 |
| 1.4.1 临床症状 |
| 1.4.2 病理变化 |
| 1.4.2.1 典型病理变化 |
| 1.4.2.2 非典型病理变化 |
| 1.5 新城疫诊断技术研究进展 |
| 1.5.1 血清学诊断技术 |
| 1.5.1.1 血凝抑制试验 |
| 1.5.1.2 琼脂扩散试验 |
| 1.5.1.3 免疫荧光技术 |
| 1.5.1.4 酶联免疫吸附试验 |
| 1.5.2 分子生物学诊断技术 |
| 1.5.2.1 反转录-聚合酶链反应 |
| 1.5.2.2 基因芯片技术 |
| 1.5.2.3 核酸探针技术 |
| 1.5.2.4 单克隆抗体技术 |
| 1.5.2.5 RNA指纹图谱法 |
| 1.5.2.6 荧光实时定量检测技术 |
| 1.6 新城疫免疫研究进展 |
| 1.6.1 新城疫免疫 |
| 1.6.1.1 体液免疫 |
| 1.6.1.2 细胞免疫 |
| 1.6.1.3 黏膜免疫 |
| 1.6.1.4 被动免疫 |
| 1.6.2 新城疫疫苗 |
| 1.6.2.1 活苗 |
| 1.6.2.2 灭活苗 |
| 1.6.2.3 基因工程疫苗 |
| 试验研究 |
| 西安市鸡新城疫疫苗免疫规程 |
| 2.1 疫苗 |
| 2.1.1 疫苗组织和采购 |
| 2.1.2 疫苗的运输和贮藏 |
| 2.2 免疫接种 |
| 2.2.1 家禽健康检查 |
| 2.2.2 接种前准备工作 |
| 2.2.2.1 疫苗的检查 |
| 2.2.2.2 疫苗的预温 |
| 2.2.3 免疫注射 |
| 2.3 免疫效力保证措施 |
| 2.3.1 规范操作 |
| 2.3.2 建立档案 |
| 2.3.3 落实防疫责任 |
| 西安市鸡新城疫免疫抗体监测 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.1.1 实验样品 |
| 3.1.1.2 实验试剂 |
| 3.1.1.3 实验仪器 |
| 3.1.1.4 主要溶液的配制 |
| 3.1.2 方法 |
| 3.1.2.1 检验依据 |
| 3.1.2.2 检测方法 |
| 3.1.2.3 结果判定 |
| 3.1.2.4 数据分析 |
| 3.2 2011‐2015 年西安市免疫鸡群监测结果与分析 |
| 3.2.1 2011‐2015 年西安市新城疫免疫抗体合格率 |
| 3.2.2 2011‐2015 年西安市不同季节新城疫免疫抗体合格率 |
| 3.3 2015 年西安市鸡新城疫免疫检测 |
| 3.3.1 不同检测点免疫抗体合格率 |
| 3.3.2 不同日龄段鸡群的免疫抗体合格率 |
| 3.3.3 疫苗接种时间与抗体水平 |
| 3.3.4 接种疫苗次数和抗体水平 |
| 3.3.5 不同免疫方法与抗体水平 |
| 3.4 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（9）检测TMU、IB和ND病毒多重PCR方法的建立及应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 坦布苏病毒 |
| 1.1.1 坦布苏病毒的概述 |
| 1.1.2 坦布苏病毒的分子特征 |
| 1.1.3 坦布苏病毒的鉴别及检测方法 |
| 1.2 传染性支气管炎病毒 |
| 1.2.1 传染性支气管炎病毒的概述 |
| 1.2.2 传染性支气管炎病毒的分子特征 |
| 1.2.3 传染性支气管炎病毒的鉴别诊断方法 |
| 1.3 新城疫病毒 |
| 1.3.1 新城疫病毒的概述 |
| 1.3.2 新城疫病毒的分子特征 |
| 1.3.3 新城疫病毒的鉴别诊断方法 |
| 1.4 多重PCR技术简介 |
| 1.4.1 PCR技术的原理 |
| 1.4.2 PCR技术的应用 |
| 1.4.3 多重PCR的基本原理 |
| 1.4.4 多重PCR在病原学检测中的应用 |
| 1.5 病毒的实验室诊断方法 |
| 1.5.1 血凝及血凝抑制试验 |
| 1.5.2 琼脂凝胶扩散试验 |
| 1.5.3 免疫荧光技术 |
| 1.5.4 酶联免疫试验 |
| 1.5.5 抗碱性磷酸酶桥联酶标法 |
| 1.5.6 免疫组化技术 |
| 1.5.7 核酸探针技术 |
| 1.6 本研究的目的与意义 |
| 第二章 TMU、IB和 ND病毒的单一PCR检测方法的建立 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 实验毒株 |
| 2.1.2 主要试剂与仪器 |
| 2.1.3 试剂配置 |
| 2.1.4 载体和菌株 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 引物设计 |
| 2.2.2 病毒增殖 |
| 2.2.3 单一PCR体系的建立和优化 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 RT-PCR的优化 |
| 2.3.2 PCR产物序列的测定 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 TMU、IB和 ND病毒的多重PCR检测方法的建立及应用 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 实验毒株与试剂配制 |
| 3.1.2 主要试剂与仪器 |
| 3.1.3 试剂配置 |
| 3.1.4 载体和菌株 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 多重PCR体系的建立和条件优化 |
| 3.2.2 特异性试验 |
| 3.2.3 敏感性试验 |
| 3.2.4 多重PCR方法的应用 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 多重PCR反应条件的优化 |
| 3.3.2 特异性试验 |
| 3.3.3 敏感性实验 |
| 3.3.4 多重PCR方法的应用 |
| 3.4 讨论 |
| 第四章 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 |
（10）新型荧光实时定量检测新城疫病毒方法的建立及其在鸡肉食品安全控制中的应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写词表 |
| 第一章 新城疫病毒检测方法的研究进展及应用 |
| 1 引言 |
| 2 新城疫病原 |
| 2.1 新城疫病原学特点 |
| 2.1.1 分类形态 |
| 2.1.2 生物学特征 |
| 2.1.3 感染宿主 |
| 2.1.4 抵抗能力 |
| 2.2 新城疫病毒流行学特点 |
| 2.2.1 易感源 |
| 2.2.2 发病季节 |
| 2.2.3 传染途径 |
| 3 新城疫的临床症状和诊断 |
| 3.1 新城疫与类似病的鉴别诊断 |
| 3.2 新城疫的典型和非典型 |
| 3.2.1 非典型新城疫 |
| 3.2.2 典型新城疫 |
| 3.3 病理变化 |
| 3.3.1 雏鸡 |
| 3.3.2 成鸡 |
| 4 新城疫的实验室诊断技术 |
| 4.1 实验室常规检测技术 |
| 4.1.1 病毒分离与鉴定 |
| 4.1.2 电镜技术观察 |
| 4.1.3 抗原及抗体检查 |
| 4.1.4 琼脂扩散试验 |
| 4.1.5 免疫组化技术 |
| 4.2 分子生物学诊断技术 |
| 4.2.1 反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术 |
| 4.2.2 实时荧光RT-PCR |
| 4.2.3 核酸探针技术 |
| 第二章 新城疫病毒QRT-PCR检测条件优化 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 试剂与耗材 |
| 1.1.2 探针与引物合成 |
| 1.1.3 仪器设备 |
| 1.1.4 细胞与病毒 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 所用试剂配制 |
| 1.2.2 病毒培养 |
| 1.2.3 病毒RNA提取与验证 |
| 2 新城疫病毒QRT-PCR检测条件优化 |
| 2.1 新城疫病毒QRT-PCR检测条件正交试验 |
| 2.2 四个影响因素交互作用验证 |
| 2.2.1 逆转录酶与dNTP交互作用 |
| 2.2.2 dNTP酶与MgCl_2交互作用 |
| 2.2.3 逆转录酶与MgCl_2 |
| 2.2.4 逆转录酶与Taq酶 |
| 2.3 新城疫病毒QRT-PCR检测条件优化结果 |
| 2.4 四个影响因素之间的交互作用结果验证 |
| 2.4.1 逆转录酶与dNTP |
| 2.4.2 MgCl_2与dNTP |
| 2.4.3 逆转录酶与MgCl_2 |
| 2.4.4 逆转录酶与Taq酶 |
| 2.5 新城疫病毒QRT-PCR检测条件优化结果讨论 |
| 3 新城疫病毒QRT-PCR检测方法应用测定 |
| 3.1 灵敏度实验 |
| 3.1.1 灵敏度实验方法及标准曲线制作 |
| 3.1.2 传统检测方法灵敏度实验 |
| 3.2 特异性实验 |
| 3.2.1 特异性试验毒株制备 |
| 3.2.2 特异性实验方法 |
| 3.3 稳定性试验 |
| 3.4 灵敏度实验结果 |
| 3.4.1 灵敏度实验结果及标准曲线制作 |
| 3.4.2 传统检测RT-PCR方法灵敏度实验 |
| 3.5 特异性实验结果 |
| 3.6 稳定性实验结果 |
| 4 讨论 |
| 第三章 新城疫病毒新型荧光实时定量检测试剂盒的研制及应用 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试剂 |
| 1.2 耗材 |
| 1.3 探针与引物合成 |
| 1.4 仪器设备 |
| 1.5 病毒 |
| 2 新城疫病毒新型荧光实时定量检测试剂制备 |
| 2.1 探针与引物的设计与工作液的制备 |
| 2.2 阳性对照样品的制备 |
| 2.3 阴性对照样品的制备 |
| 2.4 QRT-PCR预混液制备 |
| 2.5 逆转录酶与Taq DNA聚合酶的制备 |
| 2.6 检测试剂盒的组装 |
| 3 新型荧光实时定量检测新城疫病毒试剂盒质量验证 |
| 3.1 RNA模板标准品制备 |
| 3.2 同一实验员不同批次试剂盒重复性试验 |
| 3.3 不同实验员相同试剂盒重复性试验 |
| 3.4 试剂盒保存期试验 |
| 3.5 RNA模板标准品制备结果 |
| 3.6 同一实验员不同批次试剂盒重复性试验结果 |
| 3.7 不同实验员相同试剂盒的灵敏度重复性试验结果 |
| 3.8 试剂盒保存期试验结果 |
| 3.9 新型荧光实时定量检测新城疫病毒试剂盒质量验证结果 |
| 4 新型荧光实时定量检测新城疫病毒试剂盒的应用 |
| 4.1 样品采集与处理 |
| 4.2 样品检测 |
| 4.3 检测结果 |
| 5 讨论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
四、新城疫实验室诊断技术研究进展（论文参考文献）
- [1]2017-2020年眉县5种动物疫病免疫抗体检测与分析[D]. 张芬芳. 西北农林科技大学, 2021(01)
- [2]凤翔县主要动物疫病免疫效果的检测与分析[D]. 陈莹. 西北农林科技大学, 2020(02)
- [3]非典型性鸡新城疫的诊断、预防与治疗[J]. 徐端红,路红卫. 河南农业, 2019(36)
- [4]畜禽养殖业排泄物的污染及防治对策[J]. 杜娟. 现代畜牧科技, 2019(12)
- [5]赛鸽新城疫病毒的分离鉴定及HB株灭活疫苗研究与应用[D]. 李佩瑶. 河北北方学院, 2019(01)
- [6]中山市三角镇畜禽疫病防疫情况调查分析[D]. 吴宇颖. 华南农业大学, 2018(02)
- [7]枯草菌肽可溶性粉对鸡新城疫疫苗免疫增强作用的研究[D]. 田亚凯. 河南农业大学, 2017(05)
- [8]西安市鸡新城疫免疫抗体水平调查与分析[D]. 苏琪. 西北农林科技大学, 2016(01)
- [9]检测TMU、IB和ND病毒多重PCR方法的建立及应用[D]. 马犇. 上海交通大学, 2016(01)
- [10]新型荧光实时定量检测新城疫病毒方法的建立及其在鸡肉食品安全控制中的应用[D]. 丽牧. 南京农业大学, 2015(06)